Hybridoma Fusion Thiab Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基

产品信息 Product Description

产品名称

Khoom npe

杂交瘤细胞融合筛选培养基 (HAT)

Hybridoma Fusion thiab Selection Medium (HAT)

货号 Cat. No

BRS-MED01

规格

Specification

500ml / hli

500 mL / lub raj mis

产品组分

Cheebtsam

DMEM Cov Nyiaj Tau Los: 80% (体积比)

DMEM Base nruab nrab: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Imported Fetal Bovine Serum (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Qhov nruab nrab nruab nrab: 10% (v / v)

Qhov hnyav: 100 单位/ml

Penicillin: 100 U / ml

Qhov hnyav: 100 单位/ml

Streptomycin: 100 U / ml

Hypoxanthine: 100uM

Hypoxanthine: 100 µM

Tom ntej: Thymidine 16uM

Thymidine: 16 µM

Aminopterin: 0.4uM

Aminopterin: 0.4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Lwm yam Additives: Ntau yam cytokines (cov nyiaj txaus) thiab cov tshuaj ntxiv

保存条件

Cia tej yam kev mob

-20℃保存, 有效期 18 个月.

Khaws ntawm -20 degree. Lub neej txee: 18 lub hlis.

使用方法

Cov lus qhia rau kev siv

培养基融化:

37℃水浴融化本培养基, 乙醇消毒外表面后置超净台备用;

Lub sij hawm: 本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象, 3-5min使其沉至瓶底, 然后吸取上清使用即可.

Thawing lub Medium:

Thawb qhov nruab nrab hauv ib da dej 37 degree. So sab nrauv nrog 70% ethanol thiab muab tso rau hauv lub txee biosafety rau kev siv.
Lus Cim: Cov tsos ntawm me me ntawm cov khoom siv dawb flocculent tom qab thawing yog qhov qub. Cia qhov nruab nrab sawv ntsug rau 3-5 feeb rau flocs kom nyob rau hauv qab, ces ua tib zoo sau cov supernatant siv.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合, 然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul, 9 孔) 37℃5% CO2 培养箱静置培养.

Cell Fusion thiab Seeding:

Ua cell fusion siv lub cev (electrofusion) los yog tshuaj (paub PEG) txoj kev. Rov ua dua cov hlwb fused ncaj qha rau hauv qhov nruab nrab ntawm qhov tsim nyog ntom thiab ntim:

Electrofusion: 1 × 10⁴ - 2 × 10⁴ cell / zoo

PEG fusion: 5 × 10⁴ - 1 × 10⁵ cells/zoo
Pom zoo ntim: 200 µL / qhov dej hauv 96-zoo phaj.
Incubate ntawm 37 degree, 5% CO₂ rau kab lis kev cai.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Hloov nruab nrab:

Hnub 4–8 tom qab- fusion, ua ib nrab lossis ua tiav qhov nruab nrab hloov raws li txoj kev loj hlob ntawm cov hlwb.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Kev tshuaj ntsuam Clone:

Thaum cov cell clones nyob rau hauv lub qhov dej ncav cuag ib tug tsim nyog loj, ua zoo clone soj ntsuam.

注意事项

Cov kev ceev faj

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Cov khoom no yog tshuaj lom thiab tsuas yog npaj rau kev xaiv thiab kab lis kev cai ntawm hybridoma hlwb. Nws yuav tsum tsis txhob siv rau kab lis kev cai ntawm cov tsiaj nyob, kev kuaj mob, lossis kev siv tshuaj kho mob.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养, 不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0).

Cov khoom no tsim nyog rau kev xaiv thiab kab lis kev cai ntawm hybridoma hlwb siv HGPRT xaiv qhov system. Nws tsis muaj feem xyuam rau TK lossis lwm yam kev xaiv. Qhov nruab nrab no tsis tuaj yeem siv rau cov kab lis kev cai ncaj qha ntawm HGPRT- cov hlwb tsis txaus (xws li NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液, pH 7.2 ~ 7.4, 取用需在无菌条件下进行.

Cov khoom no yog cov tshuaj tsis muaj menyuam nrog pH ntawm 7.2-7.4. Txhua qhov kev tuav pov hwm yuav tsum tau ua nyob rau hauv cov xwm txheej aseptic.